产品简介

本试剂盒采用高效的裂解结合缓冲液系统，结合本公司采用的新型磁珠，在一定条件下可高效、专一吸附DNA，最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物；而当条件改变时，磁珠亦可极大限度的释放核酸DNA，达到高效分离DNA的目的。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。整个提取过程不涉及有机试剂，同时适合高通量工作站的自动化提取。

使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

产品特点

●样本适用性广：可从新鲜或冻存的抗凝血（EDTA、肝素等）、白膜层、血凝块、唾液、口腔拭子等样品中直接提取基因组DNA。

●高质量：纯化的DNA具有高浓度，高纯度，完整性好等特点。

●快速无毒：采用磁珠吸附原理，无需酚/氯仿，40 min内即可完成实验。

提取得率

产品组分

储存条件

试剂盒置于室温（15 ~ 30℃）干燥条件下可保存12个月，更长时间的保存应置于2 ~ 8℃。在2 ~ 8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀。

注意事项

1.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小、提取量下降。

2.若裂解/结合液GAL中有沉淀，可在58℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。

3.本产品适用于手工提取或自动化仪器提取。

4.最适上样量：建议血液上样量为100 ~ 200 μL。

5.使用前先在洗涤液W1和漂洗液W2中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

操作步骤

1.准备干净的1.5 mL离心管，按顺序加入20 μL蛋白酶K（20 mg/mL），100 ~ 200 μL全血样本，最后加入300 μL裂解/结合液GAL，涡旋震荡30 s以混匀；65℃放置15 min，每隔1 ~ 3 min上下颠倒5次混匀。

注意：多个样本同时提取时，可按比例预先将蛋白酶K与裂解/结合液GAL混合混匀使用，混合液比实际使用量多配制约5% ~ 10%。混合液现配现用，放置时间不宜超过20 min。

2.将上一步溶液从水浴锅取出，室温放置约3 min平衡溶液至室温；加入350 μL异丙醇，涡旋混匀约10 s；再加入50 μL DNA结合磁珠，涡旋或上下颠倒混匀20 s，室温静置7 min，每隔1 ~ 3 min上下颠倒5次混匀。

3.瞬时离心2 s，收集管壁液体。

4.将离心管转移至磁力架上，放置2 min吸附磁珠，小心吸弃所有溶液。

5.加入700 μL 洗涤液W1（已加入无水乙醇），涡旋混匀，将管壁磁珠完全悬浮于溶液中，瞬时离心2 s收集管壁液体，转移至磁力架上静置1 min，或待溶液完全澄清时，小心吸弃所有溶液。

6.重复步骤5一次。

7.加入700 μL 漂洗液W2（已加入无水乙醇），涡旋混匀，将管壁磁珠完全悬浮于溶液中，瞬时离心2 s收集管壁液体，转移至磁力架上静置1 min，或待溶液完全澄清时，小心吸弃所有溶液。

8.重复步骤7一次。

9.将离心管从磁力架上取下，瞬时离心3 s收集管壁残留液体，置于磁力架上十几秒吸附磁珠，用200 μL移液器吸头移去所有残留液体，保持离心管盖打开状态，于空气中干燥10 ~ 15 min。

注意：干燥时间与磁珠加入量、空气湿度和环境温度有关，实际干燥时间应灵活增减，以磁珠表面无明显水珠光泽，离心管无残留液体为宜，磁珠过度干燥会造成DNA难以洗脱而影响得率。

10.加入50 ~ 100μL洗脱液TE或无菌超纯水，涡旋1 min重悬磁珠，将离心管置于58℃水浴锅中孵育5 min，期间可每隔2 ~ 3 min摇动离心管加速DNA溶解。

11.瞬时离心2 s收集管壁磁珠及液体，将离心管转移至磁力架上，静置1 ~ 2 min，小心转移DNA溶液至新的1.5 mL离心管中。DNA溶液可于2 ~ 8℃中暂时保存1 ~ 2天，长时间保存请将DNA溶液置于-20℃。

DNA检测

试剂盒提取的基因组DNA片段大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关，可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。

DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50 μg/mL双链DNA、40 μg/mL单链DNA。

OD260/OD280比值应为1.7 ~ 1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。放置时间较长的血液，其比值也会有一定程度的降低。

科研支持