产品简介

本试剂盒采用高效的裂解结合缓冲液系统提取血液基因组DNA，结合本公司特有的新型材料，可高效、专一吸附DNA，最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

产品特点

●样本适用性广：可从新鲜或冻存的抗凝血（EDTA、肝素等）、白膜层、血凝块、唾液、口腔拭子等样品中直接提取基因组DNA。

●高质量：纯化的DNA具有高浓度，高纯度，完整性好等特点。

●快速无毒：采用硅基吸附原理，无需酚/氯仿，20 min内即可完成实验。

产品组分

保存条件

试剂盒于室温（15 ~ 30℃）干燥条件下可保存12个月，更长时间的保存应置于2 ~ 8℃。2 ~ 8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀。

注意事项

1.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小、提取量下降。

2.若结合缓冲液GB中有沉淀，可在58℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。

3.所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。

4.使用前，按瓶子标签提示，在洗涤液W1和漂洗液W2中加入无水乙醇。

操作步骤

1.样本预处理（本产品适用于处理0.1 ~ 1.0 mL新鲜或冻存抗凝血液样本）

*：若血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，建议取血样5 ~ 20 μL，补加无菌超纯水至200μL。

**：红细胞裂解液需自备。

2.向装有200 μL样本的1.5 mL离心管中，依次加入20 μL蛋白酶K（20mg/mL）和250μL裂解/结合液GB，涡旋震荡30 s以混匀，58℃水浴锅孵育10 min，每隔1 ~ 3 min上下颠倒5次混匀。

注意：若样本体积＞200 μL，需按比例增加蛋白酶K及裂解/结合液GB。

3.将离心管从水浴锅中取出，静置2 ~ 5 min平衡至室温，加入250 μL无水乙醇，上下颠倒15次混匀，可马上进行下一步操作。

4.瞬时离心，收集管壁液体。

5.将上一步所得溶液全部转移至吸附柱DB1中（注意不要将溶液加到管口位置），10,000rpm离心15 ~ 30 s，弃去流出液，将吸附柱DB1放回收集管中。吸附柱最大装液量为750 μL，若溶液体积超过750 μL，可分多次过柱。

6.向吸附柱DB1中加入650 μL 洗涤液W1（已加入无水乙醇），10,000 rpm离心15 ~ 30 s，弃去流出液，将吸附柱DB1放回收集管中。

7.向吸附柱DB1中加入650 μL漂洗液W2（已加入无水乙醇），10,000 rpm离心15 ~ 30 s，弃去流出液，将吸附柱DB1放回收集管中。

8.重复步骤7一次。

9.将吸附柱DB1放回收集管中，12,000 rpm离心2 min。将吸附柱DB1转移至新的1.5 mL离心管中，打开吸附柱管盖，室温放置2 ~ 3 min以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。

10.向吸附膜中间位置悬空滴加30 ~ 100 μL 洗脱液TB，室温放置2 ~ 5 min，12,000 rpm离心1 min，将溶液收集到离心管中，于-20℃保存。

DNA检测

试剂盒提取的基因组DNA片段大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关，可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。

DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50 μg/mL双链DNA、40 μg/mL单链DNA。

OD260/OD280比值应为1.7 ~ 1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。放置时间较长的血液，其比值也会有一定程度的降低。

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