RNA Clean Beads
RNA Clean Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization) 原理,能够特异性地吸附RNA,有效去除蛋白、盐离子和其他杂质,常用于纯化去除rRNA后的RNA样本回收。纯化后的RNA适用于RNA文库的构建、RT-PCR等。本产品与目前广泛使用的AMPure XP Beads使用方式完全相同,大小分布与片段回收率均与AMPure XP Beads高度一致,可完美替代AMPure XP Beads。
冰袋运输,2℃~ -8℃保存,有效期一年,避免冷冻。
1、准备工作
将RNA Clean Beads从2 ~ 8℃冰箱取出,至少在室温平衡半个小时。并配制80%乙醇。
2、RNA纯化
1)颠倒或旋涡振荡使磁珠液充分混匀,使用移液器吸取2x磁珠液加入RNA样品中,轻轻吸打10次充分混匀。
2)室温孵育5-10 min,使RNA结合到磁珠上。
3)将样品置于磁力架上,待溶液澄清后(约5 min),小心移除上清。
4)保持样品始终处于磁力架上,加入200 μl新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠,室温孵育30 sec,小心移除上清。
5)重复步骤4一次,总计漂洗二次。
6)保持样品始终处于磁力架上,室温下开盖干燥磁珠约5 - 10 min。
7)将样品从磁力架上取出,加入适量无核酸酶水,涡旋振荡或使用移液器吹打充分混匀,室温静置2 min。在磁力架上静置5 min待溶液澄清后,小心吸取上清至一个新的无核酸酶离心管中。RNA保存于-80℃或者立马进行下一步实验。
1、为了您的健康和安全,请穿戴实验服与一次性手套和口罩操作。
2、操作过程需要严格保证无RNase酶和核酸污染。
3、磁珠使用前须在室温平衡至少30 min,这样可以保证RNA的回收率。使用前,请旋涡振荡或充分颠倒以保证混匀。
4、80%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率;80%乙醇洗涤时,需要保持样品管静置于磁力架上,并且不要搅动磁珠。晾干时,要避免磁珠过分干燥。
5、本产品仅用作科研用途!